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熒光蛋白激發(fā)光源的選擇

更新時間:2023-01-03   點擊次數(shù):2468次

熒光蛋白激發(fā)觀測燈的光源選擇

信息摘要:

熒光蛋白激發(fā)觀測燈是用來快速觀察篩選目標(biāo)基因表達(dá)的工具,美國路陽生產(chǎn)的熒光蛋白激發(fā)觀測燈能夠觀察綠色熒光蛋白、藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白、紅色熒光蛋白等多種熒光蛋白的表達(dá)。面對多種熒光蛋白該如何快速選擇理想的熒光蛋白激發(fā)觀測燈?現(xiàn)在美國路陽中國公司的技術(shù)工程師將選型問題總結(jié)如下:

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熒光蛋白激發(fā)觀測燈是用來快速觀察篩選目標(biāo)基因表達(dá)的工具,美國路陽生產(chǎn)的熒光蛋白激發(fā)觀測燈能夠觀察綠色熒光蛋白藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白紅色熒光蛋白等多種熒光蛋白的表達(dá)。面對多種熒光蛋白該如何快速選擇理想的熒光蛋白激發(fā)觀測燈?現(xiàn)在美國路陽中國公司的技術(shù)工程師將選型問題總結(jié)如下:
熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415系列能夠選擇405nm、450nm、488nm、505nm、530nm等多種波段,每種波段對應(yīng)一種熒光蛋白,根據(jù)自己的熒光蛋白選擇合適的波長。

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415 R和L波段:

R波段為450nm,L波段為488nm,這2給波段主要用于觀察綠色熒光蛋白。綠色熒光蛋白(Green fluorescent protein,簡稱GFP)應(yīng)該在450nm、365nm、488nm里面選一種,因綠色熒光蛋白有近百種,盡管都是綠色熒光蛋白,但激發(fā)波長從320nm到500nm都有,在選擇激發(fā)觀測燈時,一定要搞清楚具體是哪種綠色熒光蛋白,這種熒光蛋白的激發(fā)主峰在什么波段,有了激發(fā)光譜圖,選擇靠近主峰的波段,就是理想的激發(fā)波長。如果是增強型綠色熒光蛋白,選擇450nm或488nm是理想的。那么選擇LUYOR-3415熒光蛋白激發(fā)觀測燈的R波段,如果是野生型GFP(Wild-type GFP,wtGFP),建議選擇365nm波段,推薦使用LUYOR-3410UV便攜式高強度紫外線燈

圖1.綠色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415 C波段:

C波段為505nm,主要是用于激發(fā)黃色熒光蛋白(Yellow Fluorescent Protein ,YFP)基因的表達(dá)。黃色熒光蛋白主要有Citrine, Venus, and Ypet。如果您的載體里面的標(biāo)記基因用的是Citrine, Venus, and Ypet,那么就選擇LUYOR-3415的C波段。


圖2.黃色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415 G波段:

G波段為530nm波段,用來激發(fā)和觀察紅色熒光蛋白(Red fluorescent protein,簡稱RFP) 的表達(dá)。紅色熒光蛋白常用的有DsRed2,mCherry、mRuby2,tdTomato

圖3.紅色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415 V波段:

V波段:為405nm波段,是用來觀察青色熒光蛋白(Cyan Fluorescent Protein簡稱CFP)的表達(dá),青色熒光蛋白激發(fā)波長為405nm,發(fā)射波長為485nm,如果您是用的CFP,那么選擇LUYOR-3415 V波段.

圖4.青色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈 U波段:

U波段:為365nm波段,是用來觀察藍(lán)色熒光蛋白(blue Fluorescent Protein簡稱BFP)的表達(dá)和 野生型GFP(Wild-type GFP,wtGFP),推薦使用LUYOR-3410UV便攜式高強度紫外線燈。

圖1.wtGFP綠色熒光蛋白激發(fā)光譜圖

熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415出廠時內(nèi)置兩種波段,大家根據(jù)自己常用的熒光蛋白選擇2種,如果您還不是很明白,建議您和美國路陽上海公司的銷售工程師自己溝通。有他們根據(jù)您的需求,幫助您選擇理想的型號。

上圖為:熒光蛋白激發(fā)觀測燈LUYOR-3415


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